BL21 (DE3) pLysS Chemically Competent Cell BL21 (DE3) pLysS化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

產(chǎn)品描述

BL21 (DE3) pLysS化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞是大腸桿菌BL21(DE3)pLysS經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細(xì)胞，可用于DNA的熱擊轉(zhuǎn)化。該菌株攜帶pLysS質(zhì)粒，具有氯霉素抗性（Cam^r），PLysS含有表達(dá)T7溶菌酶的基因，能夠降低目的基因的背景表達(dá)水平，但不干擾目的蛋白的表達(dá)。

本品適合毒性蛋白和非毒性蛋白的表達(dá)。使用pUC19質(zhì)粒檢測，本品轉(zhuǎn)化效率可達(dá)10⁷。BL21 (DE3) pLysS Chemically Competent Cell BL21 (DE3) pLysS化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

基因型：F- ompT hsdSB(rB - mB -) gal dcm(DE3)pLysS Camr。

運(yùn)輸和保存方法

干冰運(yùn)輸。

BL21 (DE3) pLysS化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞于-80℃保存，pUC19質(zhì)粒≤-20℃保存。有效期半年。不可于液氮中保存！

注意事項(xiàng)

1）感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用。

BL21 (DE3) pLysS Chemically Competent Cell BL21 (DE3) pLysS化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞2）待轉(zhuǎn)化DNA加入體積不要超過感受態(tài)細(xì)胞體積的1/10。

3）待轉(zhuǎn)化DNA加入感受態(tài)細(xì)胞后，請勿用移液槍吹打，輕輕彈勻即可。

4）為確保*高效率轉(zhuǎn)化，整個(gè)操作過程應(yīng)盡量輕柔，并保持低溫。

5）本品應(yīng)于-80℃保存，請勿將感受態(tài)細(xì)胞儲存于-20℃或液氮中保存。

6）為了您的**和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

使用方法

1）將感受態(tài)細(xì)胞從-80℃中取出，置于冰水浴中融化。BL21 (DE3) pLysS Chemically Competent Cell BL21 (DE3) pLysS化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞

2）將待轉(zhuǎn)化DNA加入到100 μl感受態(tài)細(xì)胞中，輕輕彈勻，冰上孵育30分鐘。

3）42℃水浴，不要晃動，準(zhǔn)確熱激90s后，立刻置于冰水浴中，靜置2-3分鐘。

4）向離心管中加入900 μl LB或SOC培養(yǎng)基，37℃水浴鍋中靜置10分鐘。

5）150 rpm, 37℃振蕩培養(yǎng)45分鐘，使菌體復(fù)蘇，抗性基因表達(dá)。

6）2,500 g離心5分鐘，去掉900 μl上清。用剩余培養(yǎng)基將菌體重懸，用無菌涂布棒在含有正確抗性的平板上輕輕涂勻。室溫正置10分鐘。待菌液被平板吸收后，37℃倒置培養(yǎng)過夜。

【注】：也可直接吸取100-200 μl孵育后的菌液涂板。剩余菌液可在4℃保存，一周之內(nèi)都可重新涂板。BL21 (DE3) pLysS Chemically Competent Cell BL21 (DE3) pLysS化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞