ISP 5 medium數(shù)量： 大量
保質(zhì)期： 一年
保存條件： 常溫避光保存

ISP 5 medium注意事項(xiàng)：提取過(guò)程應(yīng)盡量在低溫環(huán)境中進(jìn)行，蛋白質(zhì)的去除以酚/混合效果*好，可以采取多次抽提盡量將蛋白質(zhì)除干凈，在沉淀DNA 時(shí)通常使用冰乙醇，在低溫條件下放置可使DNA沉淀完全。同時(shí)反應(yīng)中加入的鹽濃度一定要控制好，當(dāng)加入的鹽溶液濃度太低時(shí)，ISP 5 medium只有部分DNA形成DNA鉀鹽而聚合，這樣就造成DNA沉淀不完全，當(dāng)加入的鉀溶液濃度太高時(shí)，其效果也不好。在沉淀的DNA中，由于過(guò)多的鹽雜質(zhì)存在，影響DNA的酶切等反應(yīng)，必須要進(jìn)行洗滌或重沉淀。一般情況下都是加入的*終濃度達(dá)0.1～0.25mol/L為宜。一、ISP 5 medium設(shè)計(jì)兩對(duì)引物，A（1上游，2下游），B(3上游，4下游）,A的下游引物和B的上游引物至少有15個(gè)堿基的重疊部分。A，B基因擴(kuò)增出來(lái)后，回收純化。用高真酶擴(kuò)增。
二、然后將A、B的回收產(chǎn)物1：1加入到PCR體系中，作為模板，用1，4引物拼接A、B，形成融合基因。
ISP 5 medium分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)都有哪些：PCR 分子克隆 核酸電泳、瓊脂糖凝膠電泳 測(cè)序 DNA,RNA 提取 轉(zhuǎn)化外源DNA 體外轉(zhuǎn)錄、逆轉(zhuǎn)錄 cDNA文庫(kù)構(gòu)建 原位雜交、酵母雙雜交、差減雜交、扣除雜交 藍(lán)白斑篩選、***篩選 基因工程技術(shù)大部分都是依據(jù)分子生物學(xué)原理設(shè)計(jì)出來(lái)的.