闡明蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能是后基因組研究的一個(gè)重要課題。高效率的蛋白質(zhì)表達(dá)系統(tǒng)是研究這些課題的不可缺少的基本技術(shù)。大腸桿菌作為宿主的表達(dá)系統(tǒng)中被廣泛使用于生產(chǎn)重組蛋白。大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)具有良好的優(yōu)勢(shì),方法簡(jiǎn)單，成本低。然而，對(duì)于某些基因，蛋白表達(dá)很困難，表達(dá)的蛋白質(zhì)不溶。

為了解決這些問(wèn)題，TAKARA與Masayori Inouye教授（美國(guó)新澤西醫(yī)學(xué)和牙科大學(xué)）進(jìn)行聯(lián)合研究，以制定一個(gè)高效基于低溫冷休克蛋白基因的大腸桿菌表達(dá)載體。pCold DNA系列產(chǎn)品具有上述的優(yōu)點(diǎn)，并提供了一個(gè)重要功能和結(jié)構(gòu)的分析以及其他蛋白質(zhì)研究領(lǐng)域的工具。

<產(chǎn)品概況和特點(diǎn)>
當(dāng)培養(yǎng)的大腸桿菌的溫度充分降低，幾乎暫時(shí)停止生長(zhǎng)大部分的蛋白表達(dá)減少，而此時(shí)一組蛋白質(zhì)稱(chēng)為“冷休克蛋白”被專(zhuān)門(mén)誘導(dǎo)表達(dá)。

冷休克表達(dá)載體，pCold I-IV，是利用冷休克基因CSPA啟動(dòng)子設(shè)計(jì)高效率蛋白質(zhì)表達(dá)載體。 CSPA的啟動(dòng)子的下游處，插入了lac操縱子，以便嚴(yán)格控制表達(dá)。此外，5'非翻譯區(qū)（5'UTR），翻譯增強(qiáng)元件（TEE），His標(biāo)簽序列，Xa因子切割位點(diǎn)和多克隆位點(diǎn)（MCS）位于在CSPA啟動(dòng)子的下游的。由于該產(chǎn)品采用了大腸桿菌的啟動(dòng)子，大多數(shù)大腸桿菌菌株可被用作表達(dá)宿主。有四種類(lèi)型的pCold載體，他們的下列原件的位置稍有不同，TEE，His標(biāo)簽序列和Factor XA酶切位點(diǎn)。