pYES6/CT的是一個5.8 kb的載體,設(shè)計(jì)用來在釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中誘導(dǎo)表達(dá)重組蛋白。
該載體包含以下元素:
1. 酵母GAL1啟動子,能夠在釀酒酵母中被半乳糖高水平的誘導(dǎo)蛋白表達(dá)目的蛋白,同時能夠被葡萄糖抑制表達(dá)
2.多克隆位點(diǎn)可以使用的10個限制酶切位點(diǎn),和兩個BstX I酶切位點(diǎn),便于基因插入。
3.氨芐抗性基因能夠方便在大腸桿菌中的進(jìn)行載體篩選。
4.殺稻瘟菌素(Blasticidin)抗性基因能夠方便在大腸桿菌和酵母中的進(jìn)行載體篩選。
5. 載體C端編碼V5抗原表位和His純化標(biāo)簽,便于蛋白純化和western blot檢測。
6. 在酵母中,利用載體上的2μ復(fù)制子維持質(zhì)粒的高拷貝。