pHIL-D2載體的詳細(xì)信息如下:
? pHIL-D2載體大小8,210 bp,是融合表達(dá)載體。
? 載體構(gòu)建過(guò)程中,可供使用的單一限制性內(nèi)切酶位點(diǎn)為EcoR I.
? 胞內(nèi)表達(dá)蛋白基因。
? 在載體構(gòu)建過(guò)程中,需要在基因上添加起始密碼子ATG。
? 畢赤酵母中利用HIS4進(jìn)行篩選。
? 為了將基因插入GS115或KM71的AOX區(qū), 使用SacI限制性內(nèi)切酶線性化質(zhì)粒(GS115中產(chǎn)生His+Mut+基因型,KM71中產(chǎn)生His+ MutS基因型)
?為了將基因插入GS115或KM71的His4區(qū), 使用Sal I或者Stu I限制性內(nèi)切酶線性化質(zhì)粒(GS115中產(chǎn)生His+ Mut+基因型,KM71中產(chǎn)生His+ MutS基因型)
?將基因插入GS115的AOX1區(qū)域,需要使用Bgl II線性化質(zhì)粒 (產(chǎn)生His+MutS基因型)。