pHIL-S1載體基本信息
載體名稱: | pHIL-S1, pHIL S1 |
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質粒類型: | 畢赤酵母蛋白表達載體 |
表達水平: | 高拷貝 |
啟動子: | AOX1 |
克隆方法: | 多克隆位點,限制性內切酶 |
載體大小: | 8260 bp |
5' 測序引物及序列: | 5′ AOX1:5′-GACTGGTTCCAATTGACAAGC-3′; |
3' 測序引物及序列: | 3′ AOX1:5′-GCAAATGGCATTCTGACATCC-3′ |
載體標簽: | N-PHO1分泌信號肽 |
載體抗性: | Ampicillin |
篩選標記: | HIS4 |
備注: |
利用PHO1信號肽,分泌表達蛋白。
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產品目錄號: | K1710-01 |
穩(wěn)定性: | 穩(wěn)定 Stable |
組成型: | 組成型 Constitutive |
病毒/非病毒: | 非病毒 |
pHIL-S1載體的詳細信息如下:
? pHIL-S1載體大小8,260 bp,是融合表達載體。
? 載體構建過程中,可供使用的單一限制性內切酶位點為Xho I, EcoR I, Sma I, BamH I.
? 利用PHO1分泌信號肽,分泌表達蛋白基因。
? 在載體構建過程中,你的基因必須保證與信號肽的起始密碼子的讀碼框一致。
? 畢赤酵母中利用HIS4進行篩選。
? 為了將基因插入GS115或KM71的AOX區(qū), 使用SacI限制性內切酶線性化質粒(GS115中產生His+Mut+基因型,KM71中產生His+ MutS基因型)
?為了將基因插入GS115或KM71的His4區(qū), 使用Sal I或者Stu I限制性內切酶線性化質粒(GS115中產生His+ Mut+基因型,KM71中產生His+ MutS基因型)
?將基因插入GS115的AOX1區(qū)域,需要使用Bgl II線性化質粒 (產生His+MutS基因型)。