pGAPZα B載體基本信息
載體名稱: | pGAPZalpha B, pGAPZα B, pGAPZalphaB, pGAPZαB |
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質(zhì)粒類型: | 畢赤酵母蛋白表達(dá)載體 |
表達(dá)水平: | 高拷貝 |
啟動(dòng)子: | GAP |
克隆方法: | 多克隆位點(diǎn),限制性內(nèi)切酶 |
載體大小: | 3151 bp |
5' 測(cè)序引物及序列: | alpha-Factor-F: 5′-TACTATTGCCAGCATTGCTGC-3′; pGAP-F:5′-GTCCCTATTTCAATCAATTGAA-3′ |
3' 測(cè)序引物及序列: | 3′ AOX1:5′-GCAAATGGCATTCTGACATCC-3′ |
載體標(biāo)簽: | C-Myc, C-His |
載體抗性: | Zeocin 博來霉素 |
篩選標(biāo)記: | HIS4/ Zeocin |
備注: |
插入基因是必需包含起始密碼子ATG。
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產(chǎn)品目錄號(hào): | V200-20 |
穩(wěn)定性: | 穩(wěn)定 Stable |
組成型: | 組成型 Constitutive |
病毒/非病毒: | 非病毒 |
甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)的酶在許多生物細(xì)胞中包括畢赤酵母,穩(wěn)定高水平表達(dá)。 *近,GAPDH蛋白編碼基因啟動(dòng)子(GAP)被深入研究,并在畢赤酵母中能夠高水表達(dá)重組蛋白,這取決于使用的碳源(Waterham等 人,,1997)。GAP啟動(dòng)子(PGAP)的重組蛋白表達(dá)水平略高于AOX1啟動(dòng)子。
pGAPZ A,B,和C載體(2.9 KB)和pGAPZα,B,和C(3.1 KB)載體使用GAP啟動(dòng)子在畢赤酵母中穩(wěn)定表達(dá)重組蛋白。重組蛋白表達(dá)為為帶有C-末端myc抗原表位和C端His標(biāo)簽的融合蛋白。此外,pGAPZα 表達(dá)的融合蛋白在N-端帶有釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的α-因子分泌信號(hào)肽。這兩個(gè)系列的載體都提供三個(gè)不同讀碼框的載體,以方便克隆的帶有C-端標(biāo)簽和/或N-末端分泌信號(hào)肽的載體 中。
這些載體是基于顯性選擇標(biāo)記,Zeocin(博萊霉素)的篩選標(biāo)記可以同時(shí)使用于畢赤酵母和大腸桿菌。