Karpas-299【人間變性大細胞】代數低，狀態(tài)好，發(fā)貨快，細胞庫管理規(guī)范，種類齊全，價格優(yōu)惠，在做傳代細胞培養(yǎng)之前，首先將培養(yǎng)瓶置于顯微鏡下，觀察培養(yǎng)瓶中細胞是否已長成致密單層，如已長成單層，即可進行細胞的傳代培養(yǎng)。
Karpas-299【人間變性大細胞】描述
細胞生長：懸浮
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞數量：1×106個
細胞傳代：1:3傳代,2-3天傳一代
細胞純度：92.2％
細胞活力：88.4％（Viability by Trypan Blue Exclusion）
細胞檢測：細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、**、酵母和**
細胞凍存：液氮凍存（完全培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS）
細胞運輸：干冰運輸（1
Vial）或活細胞運輸（T-25
flasks）
細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和**
Karpas-299【人間變性大細胞】培養(yǎng)條件
IMDM,90%；上等胎牛血清，10%
氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%
溫度：37攝氏度
Karpas-299【人間變性大細胞】傳代方法
顯微鏡下觀察細胞，當覆蓋80%底面積時，進行細胞傳代。注意不要等到細胞覆蓋100%的時候才傳代，那樣細胞容易老化。在生物**柜或者超凈臺中，將培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基倒到廢液缸中用PBS或者生理鹽水洗一遍加入1.5ml
0.25%含有EDTA的胰酶，在37℃培養(yǎng)箱中消化3-5分鐘后取出細胞，加入5ml培養(yǎng)基，吹打均勻后，轉移到15ml離心管中，1000rpm 離心5分鐘離心后，去掉上清，用新鮮培養(yǎng)基重懸細胞，按照1:3的比例進行細胞傳代培養(yǎng)。
Karpas-299【人間變性大細胞】傳代密度均勻，有以下幾點比較重要：
1.盡量消化細胞分散成單細胞懸液。對于易于消化的細胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細胞消化較為分散。如果不夠，延長消化時間。我見過有些剛進實驗室的師弟師妹，一上來就加1-2ml胰酶，結果細胞團大片脫落，雖然有后續(xù)吹打步驟，但我覺得效果不佳。至于難消化的細胞，怎么掌握分寸，還待自己摸索或其他戰(zhàn)友分享。
2.在以上基礎上，我覺得細胞吹勻，這步比上述提到的十字移動等更為重要。如傳代1:4 ,可以收集所有細胞至離心管，加入培養(yǎng)液重懸混勻，吸管緩慢吹打20-30次，可配合水平搖晃離心管。
3.此外我覺得培養(yǎng)液的量可能也會有講究，如6孔板中你*終加入2ml細胞懸液，尤其像這樣的小面積培養(yǎng)皿，液體表面有張力，細胞易于聚集在中間，所以我一般6孔板再加1ml以消除影響，吸管緩慢吹打15-20次左右繼續(xù)混勻。
M2-10B4【小鼠骨髓纖維原細胞】 D932 M2-10B4 小鼠骨髓纖維原細胞 小鼠 1640 貼壁
NKL【人NK細胞】 D933 NKL 人NK細胞 人 1640 懸浮
HPF【人肺成纖維細胞】 D934 HPF 人肺成纖維細胞 人 DMEM 貼壁
BIC-1【人食管腺癌細胞】 D935 BIC-1 人食管腺癌細胞 人 DMEM 貼壁
HCO【人顱骨成骨細胞】 D936 HCO 人顱骨成骨細胞 人 DMEM/F12 貼壁
HDMEC【人皮膚微血管內皮細胞】 D937 HDMEC 人皮膚微血管內皮細胞 人 DMEM 貼壁
EMT-6【小鼠乳腺癌細胞】 D938 EMT-6 小鼠乳腺癌細胞 小鼠 1640 貼壁
JHH-7【人肝癌細胞】 D939 JHH-7 人肝癌細胞 人 1640 貼壁
RPMI-7951【人黑色素瘤細胞】 D940 RPMI-7951 人黑色素瘤細胞 人 1640 貼壁
SBC-3【人小細胞肺癌細胞】 D941 SBC-3 人小細胞肺癌細胞 人 1640 貼壁
C8161【人黑色素瘤細胞】 D942 C8161 人黑色素瘤細胞 人 DMEM 貼壁
